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更新時(shí)間:2025-02-13
WB實(shí)驗(yàn)代測(cè)
免疫印跡(immunoblotting)又稱蛋白質(zhì)印跡(Western blotting),它是根據(jù)抗原抗體的特異性結(jié)合檢測(cè)復(fù)雜樣品中的某種蛋白的方法。該法是在凝膠電泳和固相免疫測(cè)定技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種新的免疫生化技術(shù)。由于免疫印跡具有SDS-PAGE 的高分辨力和固相免疫測(cè)定的高特異性和敏感性,現(xiàn)已成為蛋白分析的一種常規(guī)技術(shù)。免疫印跡常用于鑒定某種蛋白,并能對(duì)蛋白進(jìn)行定性和半定量分析。
Western blotting服務(wù)實(shí)驗(yàn)流程
u 細(xì)胞及組織蛋白質(zhì)抽提;
u 蛋白質(zhì)定量;
u 變性聚丙烯酰胺不連續(xù)凝膠電泳(SDS-PAGE);
u 蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)膜;
u 膜的封閉;
u 一抗、二抗孵育;
u 結(jié)果檢測(cè):化學(xué)發(fā)光法檢測(cè),X 膠片曝光顯影;
u 數(shù)據(jù)分析;
代測(cè)說(shuō)明:
1、有趨勢(shì),不需做預(yù)實(shí)驗(yàn)。
2、沒有趨勢(shì),要求做預(yù)實(shí)驗(yàn)。
3、WB檢測(cè)里包含了蛋白提取。
4、實(shí)驗(yàn)結(jié)束,返還膠圖。
5、一個(gè)指標(biāo)只能跑一張膜
WB實(shí)驗(yàn)代測(cè)的優(yōu)勢(shì):
1、western免疫印跡是將蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到膜上,然后利用抗體進(jìn)行檢測(cè)。對(duì)已知表達(dá)蛋白,可用相應(yīng)抗體作為一抗進(jìn)行檢測(cè),對(duì)新基因的表達(dá)產(chǎn)物,可通過(guò)融合部分的抗體檢測(cè)。