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透射電鏡全套實(shí)驗(yàn)代測(cè)

透射電子顯微鏡(Transmission Electron Microscope,簡(jiǎn)稱(chēng)TEM),可以看到在光學(xué)顯微鏡下無(wú)法看清的小于0.2um的細(xì)微結(jié)構(gòu)，這些結(jié)構(gòu)稱(chēng)為亞顯微結(jié)構(gòu)或超微結(jié)構(gòu)。

服務(wù)說(shuō)明

透射電鏡制片步驟

1、 取材固定：新鮮組織確定取材部位，盡量減小牽拉、挫傷與擠壓等機(jī)械損傷，組織體積一般不超過(guò)1mm×1mm×1mm ，迅速投入電鏡固定液4℃固定2-4h。細(xì)胞離心至管底可以看到綠豆大小的細(xì)胞團(tuán)塊，棄去培養(yǎng)液加入電鏡固定液4℃固定2-4h。0.1M磷酸緩沖液PBS（PH7.4）漂洗3次，每次15min。

2、 后固定：1%的鋨酸·0.1M磷酸緩沖液PBS（PH7.4）室溫（20℃）固定2h。0.1M磷酸緩沖液PBS（PH7.4）漂洗3次，每次15min。

透射電鏡全套實(shí)驗(yàn)代測(cè)

3、 脫水：組織依次入50%-70%-80%-90%-95%-100%-100%酒精上行脫水，每次15min。

4、 滲透：丙酮︰812包埋劑=1︰1混合液滲透過(guò)夜，純812包埋劑滲透過(guò)夜。

5、 包埋：60℃聚合48h。

6、 切片：切片機(jī)切片60—80nm超薄切片。

7、 染色：鈾鉛雙染色（2%醋酸鈾飽和水溶液，枸櫞酸鉛，各染色15min），切片室溫干燥過(guò)夜。

8、 透射電子顯微鏡下觀察，采集圖像分析。